高效液相色谱仪由储液器、泵、进样器、色谱柱、检测器、记录仪等几部分组成。高效液相色谱仪(HPLC)是应用高效液相色谱原理,主要用于分析高沸点不易挥发的、受热不稳定的和分子量大的有机化合物的仪器设备。
对样品的要求:
1、要求样品能溶于水、乙腈、甲醇、乙醇,能够在C18反相柱上保留,如使用其他色谱柱需自备;
2、需要提供测试组分的紫外吸收波长;
3、溶液样品至少0.5ml,溶液须过滤膜,无不溶性颗粒;
4、定量需要提供标准品。
高效液相色谱仪的使用方法:
1、开机设定参数(检测波长、流速),更换所需流动相,检查色谱柱是否正确。
2、排液置换管路中流动相,冲洗进样阀,洗好进样针。
3、冲洗色谱柱进行平衡,其间可提前进行样品的处理,样品信息的注册。
4、平衡好以后进空白试验,排除系统污染。
5、柱子稳定好以后进样,等待运行结束(其间清洗进样针),积分计算,出具报告。
注意事项:
1、流动相均需色谱纯度,水用20M的去离子水。脱气后的流动相要小心振动尽量不引起气泡。
2、柱子是非常脆弱的,第一次做的方法,先不要让液体过柱子。
3、所有过柱子的液体均需严格的过滤。
4、压力不能太大,尽量不要超过2000 psi。